Die Gramfärbung wurde 1884 von dem dänischen Pathologen und Bakteriologen H.C.J. Gram durch Zufall entdeckt und ist die wichtigste Differentialfärbung in der Bakteriendiagnostik. Grundlegend für die bakterielle Klassifikation macht es sie zur wichtigsten mikrobiologischen Färbemethode überhaupt und sollte von allen MikrobiologInnen in Theorie, als auch in Praxis beherrscht werden.

Bei unbekannten Bakterien Isolaten ermöglicht die Gramfärbung eine erste Einteilung in zwei großen Gruppen, die grampositiven und die gramnegativen Bakterien, die sich im Aufbau ihrer Zellwand (und weiteren Eigenschaften wie z.B. Empfindlichkeit gegenüber Antibiotika) unterscheiden.

Gramfärbung umfasst 4 Schritte: 1) Kristallviolett Färbung 2) Beizen mit Kalium-Jodid (Lugol'scher Lösung) 3) Entfärbung durch Ethanol Behandlung (Differenzierung) 4) Gegenfärbung mit Safranin Nach der Differenzierung sind grampositive Zellen violett und gramnegative Zellen rot gefärbt.

Vergleichsorganismen:

Als Kontrolle werden Vergleichsorganismen bekannter Bakterien verwendet, wenn man das Gramverhalten von unbekannten Organismen ermitteln möchte.

1) Ammoniumoxalat-Kristallviolett-Lösung nach Hucker (siehe hier Stammösungen in Mikroskopie - Praxis)