OLGA | ||
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Baustelle
-80°C Freezer –> Beste! aber nix im OLGA
-25°C Gefrierschrank –> gut! Glycerol-Stocks mit 30% weil wärmere Temperatur als Freezer
4°C Kühlschrank –> Kulturen auf Agarplatten, Wochen –> E. coli nur 4 Überlebensfähig
Lagerungen im OLGA
Glasperlen & Glycerol-Stocks
Lyophilisator
Schockgefrieren:
üblich und gut wär flüssiger Stickstoff (-196°C), aber gefährlich zum Lagern.
Daher DIYbio Alternative –> Aceton + Trockeneis (-70°C). Aceton in ein Becherglas. Becherglas auf eine Alufolie in einer Styroporbox stellen. Box mit Trockeneis Pellets füllen. Langsam Aceton direkt mit Trockeneis versetzen und somit auf -70°C bringen. Eppis/Schraubröhrchen/Aliquots gut verschließen und im Aceton schockgefrieren. Achtung! Beschriftung geht natürlich runter und Aceton tötet Zellen.
Nach dem Schockgefrieren müssen Zellen ständig auf Eis gehalten werden, sofort in den Gefrierschrank rein. Sie können nur mehr 1x aufgetaut werden und Zellen sind stark geschwächt (Regenerationszeit mit bedenken), dürfen kein weiteres Mal eingefroren werden sonst ist alles Tod.