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Citrat Medium im OLGA
Wird u.a. verwendet für:
-Selektionsmedium für Mikroorganismen (MO), welche Citrat als alleinige C-Quelle verwerten können.
-Bunte Reihe
-Anzucht von Schimmelpilzen
Originalrezept H2O 1L NaCl 5g Na3Citrat 2g Ammoniumdihydrogenphosphat 1g TriKaliumphosphat 1g Magnesiumsulfat 0,2g Bromthymolblau 0,08g Agar 15g pH 6,9 (+/-2)
OLGA Rezept:
| Diammoniumsulfat 0,22 g |
| Kaliumdihydrogenphosphat 1,824 g |
| Magnesiumchlorid 0,158 g |
| Bromthymolblau 80 mg |
| NaCl 4,806 g |
| Zitronensäure 1,489 g |
| NaOH 1,063 g |
| KOH 41 mg |
| Ammoniak (25%) 0,407 mL |
| mit ddH20 auf 1 L |
Durchführung
Alle wasserlöslichen Komponenten bis auf Agar einwiegen und in entsprechend großes Gefäß überführen (optional: Einwaage protokollieren). Dest. Wasser zugeben, wenn alles aufgelöst ist pH-Wert messen (soll zwischen 6 und 7 sein, Optimum ~6,9 / 7) Agar zugeben Autoklavieren Platten gießen
Beachte: Vorsichtiges Arbeiten mit NaOH, KOH (stark ätzend) und NH3 (ätzend, gasförmig) Genaues Arbeiten mit NaOH, KOH, NH3 und Zitronensäure (wegen pH-Wert, bei zu saurem Medium verfestigt sich Agar nicht) als Platten begrenzte Lagerfähigkeit, nach mehreren Tagen schwache Umfärbung nach blau auch ohne bakterielles Wachstum In dicht verschlossenen Schottflaschen Monate haltbar
Auswertung: Platten haben grüne Farbe, bei Wachstum und Stoffwechsel erfolgt Alkalisierung und Farbumschlag nach blau Wachstum und Farbumschlag oder auch Wachstum ohne Farbumschlag als positiv bewerten Kein Wachstum/schwacher Farbumschlag ohne Wachstum als negativ bewerten
Bedarf: Pipette Chemikalien Petrischalen Autoklav/Druckkochtopf Waage
Diskussion: Rezept ist mangels Chemikalien für Originalzusammensetzung entstanden und ausgehend von dessen Ionenkonzentration berechnet, Abweichungen bei K+ und PO4 3- Ionen Ausführung umständlicher und zeitaufwändiger als im Original, aber funktioniert und entsprechende Chemikalien sind im OLGA vorhanden