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olga:citratmedium [2019-08-14 17:42] (current) danield |
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Line 1: | Line 1: | ||
- | === Citrat Medium === | + | === Citrat Medium im OLGA === |
- | Wird u.a. verwendet für: | + | **Wird u.a. verwendet für:** |
- | Selektionsmedium für Citrat verwertende Mikroorganismen (MO) | + | |
- | Bunte Reihe | + | -Selektionsmedium für Mikroorganismen (MO), welche Citrat als alleinige C-Quelle verwerten können. |
- | Anzucht von Schimmelpilzen n=m/M | + | |
+ | -Bunte Reihe | ||
+ | |||
+ | -Anzucht von Schimmelpilzen | ||
+ | |||
- | Grundrezept Stoffmenge in Mol Stoffmenge in Bedarf in mL Einwaage Originalrezept | + | **Originalrezept** |
- | dest. H2O 1 1000 mL 100 H2O 1 L | + | H2O 1L |
- | Diammoniumsulfat 0,001662 0,2196 g 0,0220 NaCl 5 g | + | NaCl 5g |
- | Kaliumdihydrogenphosphat 0,013404 1,8242 g 0,1824 Na3Citrat 2 g | + | Na3Citrat 2g |
- | Magnesiumchlorid 0,001662 0,1582 g 0,0158 Ammoniumdihydrogenphosphat 1 g | + | Ammoniumdihydrogenphosphat 1g |
- | bromthymolblau - 0,08 g 0,0080 TriKaliumphosphat 1 g | + | TriKaliumphosphat 1g |
- | NaCl 0,082293 4,8059 g 0,4806 Magnesiumsulfat 0,2 g | + | Magnesiumsulfat 0,2g |
- | Zitronensäure 0,007750 1,489 g 0,1489 Bromthymolblau 0,08 g | + | Bromthymolblau 0,08g |
- | NaOH 0,026573 1,0629 g 0,1063 agar 15 g | + | Agar 15g |
- | KOH 0,000727 0,0408 g 0,0041 pH 6,9 +-2 | + | pH 6,9 (+/-2) |
- | Agar 0,023870 15 g 1,5000 | + | |
- | NH3 25% - 0,4065 mL 0,0407 | + | |
+ | |||
+ | OLGA Rezept: | ||
+ | |||
+ | |Diammoniumsulfat 0,22 g| | ||
+ | |Kaliumdihydrogenphosphat 1,824 g| | ||
+ | |Magnesiumchlorid 0,158 g| | ||
+ | |Bromthymolblau 80 mg| | ||
+ | |NaCl 4,806 g| | ||
+ | |Zitronensäure 1,489 g| | ||
+ | |NaOH 1,063 g| | ||
+ | |KOH 41 mg| | ||
+ | |Ammoniak (25%) 0,407 mL| | ||
+ | |mit ddH20 auf 1 L| | ||
+ | |||
+ | |||
+ | |||
+ | **Durchführung** | ||
- | Durchführung: | + | Alle wasserlöslichen Komponenten bis auf Agar einwiegen und in entsprechend großes Gefäß überführen (optional: Einwaage protokollieren). |
- | + | Dest. Wasser zugeben, wenn alles aufgelöst ist pH-Wert messen (soll zwischen 6 und 7 sein, Optimum ~6,9 / 7) | |
- | erforderliche Menge Medium berechnen (Bedarf in mL eintippen) | + | |
- | alle Komponenten bis auf Agar einwiegen und in entsprechend großes Gefäß überführen (optional: Einwaage protokollieren) | + | |
- | dest. Wasser zugeben, wenn alles aufgelöst ist pH-Wert messen (soll zwischen 6 und 7 sein, Optimum ~6,9 / 7) | + | |
Agar zugeben | Agar zugeben | ||
Autoklavieren | Autoklavieren | ||
Platten gießen | Platten gießen | ||
- | + | ||
+ | |||
Beachte: | Beachte: | ||
Vorsichtiges Arbeiten mit NaOH, KOH (stark ätzend) und NH3 (ätzend, gasförmig) | Vorsichtiges Arbeiten mit NaOH, KOH (stark ätzend) und NH3 (ätzend, gasförmig) | ||
Line 33: | Line 52: | ||
als Platten begrenzte Lagerfähigkeit, nach mehreren Tagen schwache Umfärbung nach blau auch ohne bakterielles Wachstum | als Platten begrenzte Lagerfähigkeit, nach mehreren Tagen schwache Umfärbung nach blau auch ohne bakterielles Wachstum | ||
In dicht verschlossenen Schottflaschen Monate haltbar | In dicht verschlossenen Schottflaschen Monate haltbar | ||
- | + | ||
- | Auswertung: | + | |
+ | **Auswertung:** | ||
Platten haben grüne Farbe, bei Wachstum und Stoffwechsel erfolgt Alkalisierung und Farbumschlag nach blau | Platten haben grüne Farbe, bei Wachstum und Stoffwechsel erfolgt Alkalisierung und Farbumschlag nach blau | ||
Wachstum und Farbumschlag oder auch Wachstum ohne Farbumschlag als positiv bewerten | Wachstum und Farbumschlag oder auch Wachstum ohne Farbumschlag als positiv bewerten | ||
Line 46: | Line 66: | ||
Waage | Waage | ||
- | Anmerkung: | + | **Diskussion:** |
Rezept ist mangels Chemikalien für Originalzusammensetzung entstanden und ausgehend von dessen Ionenkonzentration berechnet, Abweichungen bei K+ und PO4 3- Ionen | Rezept ist mangels Chemikalien für Originalzusammensetzung entstanden und ausgehend von dessen Ionenkonzentration berechnet, Abweichungen bei K+ und PO4 3- Ionen | ||
Ausführung umständlicher und zeitaufwändiger als im Original, aber funktioniert und entsprechende Chemikalien sind im OLGA vorhanden | Ausführung umständlicher und zeitaufwändiger als im Original, aber funktioniert und entsprechende Chemikalien sind im OLGA vorhanden | ||
realraum Graz, Brockmanngasse 15, 8010 Graz, realraum - Verein für Technik in Kultur und Gesellschaft