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--- olga:olgagramfaerbunganleitung [2020-04-09 14:42]
danield [Durchführung]
+++ olga:olgagramfaerbunganleitung [2020-04-17 09:15] (current)
laurenz
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 Die Gramfärbung wurde 1884 von dem dänischen Pathologen und Bakteriologen H.C.J. Gram durch Zufall entdeckt und ist die wichtigste Differentialfärbung in der Bakteriendiagnostik. Grundlegend für die bakterielle Klassifikation macht es sie zur wichtigsten mikrobiologischen Färbemethode überhaupt und sollte von allen MikrobiologInnen in Theorie, als auch in Praxis beherrscht werden.
-Bei unbekannten Bakterien Isolaten ermöglicht die Gramfärbung eine erste Einteilung in zwei großen Gruppen, die **grampositiven** und die **gramnegativen** Bakterien, die sich im Aufbau ihrer Zellwand (und weiteren Eigenschaften wie z.B. Empfindlichkeit gegenüber Antibiotika) unterscheiden.
+Bei unbekannten Bakterienisolaten ermöglicht die Gramfärbung eine erste Einteilung in zwei große Gruppen, die **grampositiven** und die **gramnegativen** Bakterien, die sich im Aufbau ihrer Zellwand (und weiteren Eigenschaften wie z.B. Empfindlichkeit gegenüber Antibiotika) unterscheiden.
 [[http://galley.realraum.at/_data/i/upload/2020/04/09/20200409134212-3c3f8e47-me.jpg|{{http://galley.realraum.at/_data/i/upload/2020/04/09/20200409134212-3c3f8e47-me.jpg?300x800|Unterschied Zellwand grampositiv / gramnegativ}}]]
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 ==== Verwendete Lösungen für Gramfärbung ====
-) Ammoniumoxalat-Kristallviolett-Lösung nach Hucker ([[https://realraum.at/wiki/doku.php?id=olga:olgaloesungengramfaerbung#praxis|siehe hier Stammösungen in Mikroskopie - Praxis]]) = 1. Färbemittel
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+**1)** Ammoniumoxalat-**Kristallviolett**-Lösung nach Hucker ([[https://realraum.at/wiki/doku.php?id=olga:olgaloesungengramfaerbung#praxis|siehe hier Stammösungen in Mikroskopie - Praxis - Färbung mit Kristallviolett]]) = 1. Färbemittel
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-) Lugol'sche Lösung (Jod-Kalium-Jodid) = Beizmittel
+**2) Lugol'sche Lösung** (Jod-Kalium-Jodid) = Beizmittel
 DIY:
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-) 96 %iges (w/w) Ethanol) = Entfärbemittel
+**3) 96 %iges Ethanol** = Entfärbemittel
 Für schnellere Entfärbung kann eine EtOH:Aceton = 1:1 (v/v) Lösung erstellt werden.
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-) Safranin Lösung = Gegenfärbung mit 2. Färbemittel
+**4) Safranin Lösung** = Gegenfärbung mit 2. Färbemittel
-|Safranin Stammlösung ([[https://realraum.at/wiki/doku.php?id=olga:olgaloesungengramfaerbung#praxis|siehe hier Stammösungen in Mikroskopie - Praxis]])|10 mL|
+|Safranin Stammlösung ([[https://realraum.at/wiki/doku.php?id=olga:olgaloesungengramfaerbung#praxis|siehe hier Stammösungen in Mikroskopie - Praxis - Stammösungen]])|10 mL|
 |dH20|100 mL|
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 **1 Minute einwirken lassen**
-) Objekträger schräg halten. Von oben maximal 10 Sekunden lang 96 %iges Ethanol tropfenweise verteilt laufen lassen bis das abtropfhende EtOH klar bzw. farblos ist.
+) Objekträger schräg halten. Von oben maximal 10 Sekunden lang 96 %iges Ethanol tropfenweise verteilt laufen lassen bis das abtropfende EtOH klar bzw. farblos ist.
 ) Sofort mit dH20 spülen.
-) Objekträger gerade legen. Bakterien mit vollständig mit Safranin-Lösung bedecken.
+) Objekträger gerade legen. Bakterien vollständig mit Safranin-Lösung bedecken.
 **1 Minute einwirken lassen**
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 ) Mikroskopieren :)
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+**Auswertung:**
+|Gram**positive** Bakterien sind dunkelblau bis tiefviolett gefärbt. \\ \\ Gramn**egative** Bakterien sind orange bis hellrot gefärbt.|[[https://galley.realraum.at/_data/i/upload/2020/03/17/20200317044130-59314475-me.jpg|{{https://galley.realraum.at/_data/i/upload/2020/03/17/20200317044130-59314475-me.jpg?200x500}}]]|
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+__Quellenverzeichnis:__
+Bast, Eckard; //"Mikrobiologische Methoden: eine Einführung in grundlegende Arbeitstechniken"//, 2. Auflage - Heidelberg; Berlin: Spektrum, Akad. Verl. 2001

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