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olga:citratmedium [2019-08-14 17:20] danield created |
olga:citratmedium [2019-08-14 17:42] (current) danield |
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| Line 1: | Line 1: | ||
| - | === Citrat Medium === | + | === Citrat Medium im OLGA === |
| - | Wird u.a. verwendet für: | + | **Wird u.a. verwendet für:** |
| - | Selektionsmedium für Citrat verwertende Mikroorganismen (MO) | + | |
| - | Bunte Reihe | + | -Selektionsmedium für Mikroorganismen (MO), welche Citrat als alleinige C-Quelle verwerten können. |
| - | Anzucht von Schimmelpilzen n=m/M | + | |
| + | -Bunte Reihe | ||
| + | |||
| + | -Anzucht von Schimmelpilzen | ||
| + | |||
| - | Grundrezept Stoffmenge in Mol Stoffmenge in Bedarf in mL Einwaage Originalrezept | + | **Originalrezept** |
| - | dest. H2O 1 1000 mL 100 H2O 1 L | + | H2O 1L |
| - | Diammoniumsulfat 0,001662 0,2196 g 0,0220 NaCl 5 g | + | NaCl 5g |
| - | Kaliumdihydrogenphosphat 0,013404 1,8242 g 0,1824 Na3Citrat 2 g | + | Na3Citrat 2g |
| - | Magnesiumchlorid 0,001662 0,1582 g 0,0158 Ammoniumdihydrogenphosphat 1 g | + | Ammoniumdihydrogenphosphat 1g |
| - | bromthymolblau - 0,08 g 0,0080 TriKaliumphosphat 1 g | + | TriKaliumphosphat 1g |
| - | NaCl 0,082293 4,8059 g 0,4806 Magnesiumsulfat 0,2 g | + | Magnesiumsulfat 0,2g |
| - | Zitronensäure 0,007750 1,489 g 0,1489 Bromthymolblau 0,08 g | + | Bromthymolblau 0,08g |
| - | NaOH 0,026573 1,0629 g 0,1063 agar 15 g | + | Agar 15g |
| - | KOH 0,000727 0,0408 g 0,0041 pH 6,9 +-2 | + | pH 6,9 (+/-2) |
| - | Agar 0,023870 15 g 1,5000 | + | |
| - | NH3 25% - 0,4065 mL 0,0407 | + | |
| + | |||
| + | OLGA Rezept: | ||
| + | |||
| + | |Diammoniumsulfat 0,22 g| | ||
| + | |Kaliumdihydrogenphosphat 1,824 g| | ||
| + | |Magnesiumchlorid 0,158 g| | ||
| + | |Bromthymolblau 80 mg| | ||
| + | |NaCl 4,806 g| | ||
| + | |Zitronensäure 1,489 g| | ||
| + | |NaOH 1,063 g| | ||
| + | |KOH 41 mg| | ||
| + | |Ammoniak (25%) 0,407 mL| | ||
| + | |mit ddH20 auf 1 L| | ||
| + | |||
| + | |||
| + | |||
| + | **Durchführung** | ||
| - | Durchführung: | + | Alle wasserlöslichen Komponenten bis auf Agar einwiegen und in entsprechend großes Gefäß überführen (optional: Einwaage protokollieren). |
| - | + | Dest. Wasser zugeben, wenn alles aufgelöst ist pH-Wert messen (soll zwischen 6 und 7 sein, Optimum ~6,9 / 7) | |
| - | erforderliche Menge Medium berechnen (Bedarf in mL eintippen) | + | |
| - | alle Komponenten bis auf Agar einwiegen und in entsprechend großes Gefäß überführen (optional: Einwaage protokollieren) | + | |
| - | dest. Wasser zugeben, wenn alles aufgelöst ist pH-Wert messen (soll zwischen 6 und 7 sein, Optimum ~6,9 / 7) | + | |
| Agar zugeben | Agar zugeben | ||
| Autoklavieren | Autoklavieren | ||
| Platten gießen | Platten gießen | ||
| - | + | ||
| + | |||
| Beachte: | Beachte: | ||
| Vorsichtiges Arbeiten mit NaOH, KOH (stark ätzend) und NH3 (ätzend, gasförmig) | Vorsichtiges Arbeiten mit NaOH, KOH (stark ätzend) und NH3 (ätzend, gasförmig) | ||
| Line 33: | Line 52: | ||
| als Platten begrenzte Lagerfähigkeit, nach mehreren Tagen schwache Umfärbung nach blau auch ohne bakterielles Wachstum | als Platten begrenzte Lagerfähigkeit, nach mehreren Tagen schwache Umfärbung nach blau auch ohne bakterielles Wachstum | ||
| In dicht verschlossenen Schottflaschen Monate haltbar | In dicht verschlossenen Schottflaschen Monate haltbar | ||
| - | + | ||
| - | Auswertung: | + | |
| + | **Auswertung:** | ||
| Platten haben grüne Farbe, bei Wachstum und Stoffwechsel erfolgt Alkalisierung und Farbumschlag nach blau | Platten haben grüne Farbe, bei Wachstum und Stoffwechsel erfolgt Alkalisierung und Farbumschlag nach blau | ||
| Wachstum und Farbumschlag oder auch Wachstum ohne Farbumschlag als positiv bewerten | Wachstum und Farbumschlag oder auch Wachstum ohne Farbumschlag als positiv bewerten | ||
| Line 46: | Line 66: | ||
| Waage | Waage | ||
| - | Anmerkung: | + | **Diskussion:** |
| Rezept ist mangels Chemikalien für Originalzusammensetzung entstanden und ausgehend von dessen Ionenkonzentration berechnet, Abweichungen bei K+ und PO4 3- Ionen | Rezept ist mangels Chemikalien für Originalzusammensetzung entstanden und ausgehend von dessen Ionenkonzentration berechnet, Abweichungen bei K+ und PO4 3- Ionen | ||
| Ausführung umständlicher und zeitaufwändiger als im Original, aber funktioniert und entsprechende Chemikalien sind im OLGA vorhanden | Ausführung umständlicher und zeitaufwändiger als im Original, aber funktioniert und entsprechende Chemikalien sind im OLGA vorhanden | ||
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